时间:2022-02-27 18:38
分子杂交技术是核酸结构、功能研究领域最基本的技术,它能够让核酸的分子更加灵敏,且具有很高的特异性,在克隆基因、酶切图谱、基因组特定基因序列的定性上应用十分广泛。分子杂交技术有单链DNA探针法、双链DNA探针标记法、末端标记DNA探针法等等。
1、分子杂交技术是基本技术,它的对象是DNA和RNA,可对基因工程中基因有没有进入到受体细胞进行检测,在杂交的过程中,会有很高的特异性,能够随着探针已知的序列进行检测,能在细胞内杂交,也可以在细胞原位杂交。
2、分子杂交技术的两个方面是探针、核酸,在分子生物学、酶切图谱制作、定量检测、疾病的诊断等等领域都有非常官方的应用,且医学临床的诊断中也会使用到这项技术,但需要注意区分它与DNA分子杂交技术的差异。
分子杂交技术的检测对象包括:克隆基因组DNA、细胞总DNA、细胞RNA等等,它可以对检测的核酸进行提纯,而探针必须经过标记,这样才能追踪和检测。而使用的标记物通常是同位素,因为它的安全性很高,但也有使用甾类化合物地高辛配基做标记的情况。
分子杂交技术的应用范围非常广,生物学、临床医学都在不断的增加,而在应用时需要注意的原则是:需要双链核酸分子高温解链,然后分开变成两条互补的单链,并且在恢复到原来的温度之后,双链的结构还需要能够聚合在一起,简单说就是碱基配对的原则。应用过程中常见的杂交有:菌落原位杂交、斑点杂交、southem杂交和northem杂交。